Creșterea în masă a oboselii obișnuite
Astăzi, există o serie de tehnologii pentru creșterea în masă a oboselii obișnuite. Toate tehnologiile de reproducere ale acestui prădător furnizează o cantitate mare din acest entomofag la costuri relativ mici. Creșterea masivă a obișnuitului de dantelă implică următoarele operațiuni tehnologice: obținerea de hrană pentru viermi de dantelă (ouă de molii de cereale sau alte insecte, precum și mijloace de nutrienți artificiali), incubarea ouălor prădătoare, creșterea individuală sau grupă a viermi de dantelă, păstrarea insectelor adulte, obținerea ouălor, acumularea și conservarea biomaterialului. În funcție de parametrii de mediu ai speciei, în fiecare etapă a tehnologiei de reproducere este necesară crearea anumitor condiții de temperatură și umiditate, precum și furnizarea entomofagului cu alimente de înaltă calitate. Cele mai multe bijuterii industriale biolaboratorii de lână de ras folosesc ouă de moli de cereale ca hrană pentru larve (Sitotroga cerealella
conținut
- Creșterea oboselii obișnuite pe ouăle unei molii de cereale
- Metodă de laborator de reproducere în masă a oboselii obișnuite
- Cultura uterină dantelării
- Incubarea ouălor
- Larva care
- Îngrijește adulții și obține ouă
- Depozitare lacewing
- Tehnologia de reproducere mecanizată a oboselii obișnuite
- Numirea, datele tehnice și principiul funcționării echipamentelor pentru cultivarea în masă a oboselii obișnuite
- Creșterea oboselii obișnuite pe medii nutritive artificiale
- Tipuri de medii nutritive artificiale și tehnologii pentru prepararea lor
- Obținerea hidrolizat enzimatic de cazeină
- Obținerea unui hidrolizat enzimatic de proteină de soia
- Obținerea unui amestec de lipide
- Obținerea extractului de drojdie
- Obținerea unui extract de germeni de grâu
- Pregătirea mediilor de cultură
- Fabricarea capsulelor de capsule
- Tehnica de diluare a spălării pe medii nutritive microcapsulate
Creșterea oboselii obișnuite pe ouăle unei molii de cereale
Numeroase studii efectuate pe oameni de știință autohtoni și străini au stabilit că ouăle de molie de cereale sunt un substitut complet pentru hrana naturală a larvelor prădătoare. Pentru hrănirea larvelor, de obicei se folosesc atât ouă viabile (proaspete) de sitrogene, cât și cele care și-au pierdut viabilitatea ca urmare a depozitării îndelungate la temperaturi scăzute. S-a constatat că valoarea lor nutritivă nu scade chiar și în timpul depozitării prelungite (până la trei luni). Acest lucru vă permite să le acumulați.
Creșterea în masă a spălăturilor din ouă obișnuite de molii de cereale se realizează atât într-un laborator, cât și în mod mecanizat, folosind echipamente industriale speciale.
Metodă de laborator de reproducere în masă a oboselii obișnuite
Tehnologia de creștere a laboratorului de vârf de dantelă include următoarele operațiuni: obținerea unei culturi uterine a unei laceinguri, incubarea ouălor, creșterea individuală sau grupă a larvelor, obținerea cocoanelor prădătoare, păstrarea insectelor adulte și depozitarea biomaterialelor.
Cultura uterină dantelării
Creșterea de laborator începe cu achiziția de material uterin, care poate fi obținut în alte laboratoare biologice sau biofactorii sau colectat direct în natură. Colecția de dantelări se face cel mai bine la sfârșitul verii, prinzând insectele adulte în lumină, inclusiv ultraviolete, sau prin cosirea cu o plasă de fluturi în culturile de câmp unde afidele se găsesc în masă sau scuturându-l într-o plasă de fluturi din vegetația lemnoasă. Înainte de iernare, adulții se găsesc în culturile de fructe, în grădini și parcuri, pe copaci și arbuști, unde trăiesc până pleacă la iernare în noiembrie. Dantelele adulte colectate în a doua jumătate a lunii octombrie încep deja să intre în diapauză și își schimbă culoarea de la un verde intens la un verde pal, iar apoi cu o scădere a temperaturii devin galben-verzui cu pete maro-roșii pe corp.
Incubarea ouălor
Pentru a obține larve de coeval al unui prădător, ouăle de dantelă proaspăt puse (în 24 de ore) sunt plasate într-un termostat, unde trec o perioadă de incubație la o temperatură de 25 ° C și o umiditate relativă de 80 ° C. Datorită faptului că larvele de vierme de dantelă prezintă canibalism pronunțat, cu o zi înainte de a renaște, adică la două zile de la plasarea pentru incubare, ouăle de vierme de dantelă sunt ambalate în cuști celulare special confecționate pentru creșterea individuală a larvelor. Acesta din urmă constă dintr-un teanc format din hârtie groasă sub formă de fagure, al cărui fund este gaz de moară, întins pe un cadru de lemn și un capac - o placă de sticlă. Când sunt asamblate, fiecare celulă în combinație cu partea de jos și capacul formează o grădină individuală izolată, de 7 × 12–5,0 × 12,5 mm. Se pot folosi și alte grădini..
Ouăle preparate sunt împachetate prin împrăștiere, folosind un dispozitiv simplu de tip piper pentru aceasta, la rata a două ouă pe celulă. Pentru a umple o grădină este nevoie de aproximativ 800 de ouă, ceea ce corespunde unei mase de 34,8 mg.
Larva Care
Pe întreaga perioadă de dezvoltare individuală a larvelor, acestea sunt hrănite de trei ori. Alimentarea larvelor de vierme de dantelă se realizează prin dispersarea ouălor sitrogenelor folosind același dispozitiv ca în timpul ambalării ouălor de vierme de dantelă. Prima porție de ouă molii de cereale sunt introduse simultan cu ouăle de entomofag, în proporție de 2 mg pe celulă. Apoi stratul este acoperit cu sticlă și grădina este plasată într-un termostat cu temperatura de 25 ° C. A doua hrănire a larvelor efectuat la împlinirea celei de-a doua vârste sau la cinci zile de la prima. Până acum, voracitatea lor a fost mult crescută, astfel încât doza de ouă este crescută la 14 mg pe celulă. Spre deosebire de prima din timpul celei de-a doua hrăniri, larvele prădătoare sunt pre-anesteziate cu dioxid de carbon, iar ouăle de sitotrog sunt împrăștiate uniform pe sticla pre-ulei cu miere și acoperite cu ouă de grădină. Pentru a accelera această operație, este recomandat să ai câte două pahare pentru fiecare grădină. Acest lucru vă permite să pregătiți în prealabil hrana pentru larvele de entomofag și să schimbați doar sticla din grădini în timpul hrănirii. Plăcile alimentare preparate sunt păstrate la frigider timp de trei zile sau mai mult..
A treia porție de ouă dă când larvele ating vârsta a treia, adică la trei zile după a doua. Rata ouălor în această perioadă este crescută la 16 mg pe celulă sau 6,4 g pe grădină. Atunci când alimentați larve de vierme de dantelă pentru dozele de furaje, este convenabil să utilizați măsuri volumetrice pre-pregătite, cu o capacitate corespunzătoare primei, celei de-a treia, a treia alimentări. La trei până la cinci zile după a treia hrănire, larvele termină de hrănit și pupă. Dacă respectați regimul de educație din fiecare grădină, puteți obține 450 de coconi de dantelă.
Se propune o metodă de grup pentru antrenarea larvelor de vierme de dantelă. În larvele primei și celei de-a doua vârste, cu o anumită densitate de pradă și temperatură și umiditate optime, precum și cu hrană suficientă, canibalismul prădătorilor poate fi redus la minimum. De exemplu, atunci când se păstrează larve de entomofag în borcane obișnuite de jumătate de litru de 100 de persoane fiecare, se pot obține până la 91,7 larve de secundă instar. O creștere a densității lacurilor de dantelă duce la o creștere a canibalismului, iar producția sa scade brusc. Metoda de grup de păstrare a larvelor de vierme de dantelă este justificată numai atunci când sunt obținute larve de secunda a doua. Pentru a obține imago, această metodă este inacceptabilă, deoarece larvele din al treilea rând mănâncă pupae.
Îngrijește adulții și obține ouă
La șase până la șapte zile de la formarea coconilor, aceștia sunt transferați în cuști speciale pentru educația insectelor adulte. Grădinile sunt realizate sub formă de containere cilindrice cu diametrul de 30 cm și înălțimea peretelui de 10 cm. Pentru fabricarea lor se folosește plastic vinilic, fier de acoperiș sau alt material. Ca partea de jos, se utilizează gaz de moară cu o dimensiune a ochiurilor de 1,5 × 1,5 mm. Partea de sus a grădinii este acoperită cu o cârpă densă sau hârtie. Gazul, hârtia sau pânza de moară este fixată în grădină cu un cerc încărcat de un șurub special. Pe partea interioară a pereților grădinii, sunt instalate suporturi de plăci de plastic cu vinil variabile, pe care se aplică picături de hrană pentru insecte. Fiecare grădină poate conține până la 200 de prădători adulți. Multitudinea mare de insecte din grădini duce la scăderea fecundității entomofagelor. S-a stabilit că, odată cu o modificare a densității spălăturilor de la 85 la 350 de persoane pe grădină, fertilitatea unui prădător scade de trei ori, iar cu o densitate optimă, depunerea în masă a ouălor de către insecte începe cu 10-15 zile mai devreme decât la o densitate ridicată.
Fecunditatea scobirii este influențată în mare măsură de natura furajului imago. Cea mai mare capacitate de reproducere la insecte este observată atunci când le hrăniți cu alimente carbohidrate-proteine. Predatorii au o fecunditate ridicată atunci când hrănesc spălăturile de sex feminin cu maltoză în combinație cu fructoză, fertilitate mai mică atunci când glucoza și zaharoza sunt introduse în dietă, iar când zaharoza este înlocuită de zahăr, fecunditatea insectelor scade de 1,5-2,0 ori.
Siropul de miere și zahărul sunt de obicei utilizate ca sursă de carbohidrați pentru hrănirea dantelelor adulte, iar autolizatul de drojdie de bere este utilizat ca hrană proteică. La furajele de mai sus, este bine să adăugați o soluție de 2% de pâine de albine. Adăugând chiar și o cantitate mică de pâine de albine la dieta insectelor le crește durata de viață. Atunci când alimentați un carbohidrat sau aliment proteic, parametrii biologici ai entomofagului sunt reduse.
Tehnica de hrănire a insectelor este aceea că mierea sau un autolizat de drojdie se aplică pe pereții interni ai file, sub formă de rânduri de picături care se alternează. În primele patru până la cinci zile, insectele sunt hrănite doar cu miere sau sirop de zahăr și apoi se autolizează mierea și drojdia de bere, fiecare dintre ele fiind aplicată separat. Distanța dintre picăturile de miere ar trebui să fie de aproximativ 3 cm. Autolizatul se aplică pe file pe fiecare două rânduri de miere. Numărul de picături de miere la rând pe întreaga înălțime a filei 10-12, drojdie - 5-6.
La schimbarea hranei, pentru a preveni răspândirea insectelor, acestea sunt anesteziate. Pentru a face acest lucru, utilizați un dispozitiv special cu aspirație de aer (un ventilator casnic obișnuit este instalat pe partea inferioară a mesei cu o gaură decupată în funcție de diametrul grădinii). Când ventilatorul este pornit, insectele sunt presate pe fundul rețelei cuștii cu un flux de aer. În prezent, materialul sau hârtia superioară cu ouă depuse sunt îndepărtate, iar filele sunt schimbate.
Ouăle se recoltează prin tăierea tulpinilor cu un aparat de ras de siguranță. Cu toate acestea, trebuie avut în vedere că, în acest caz, aproximativ 20 dintre aceștia mor din cauza deteriorărilor mecanice. O metodă mai convenabilă, bazată pe dizolvarea tulpinilor de ouă într-o soluție 0,8 de hipoclorit de sodiu. Pentru a face acest lucru, hârtia sau țesătura din cușcă cu ouăle dantelate este cufundată timp de 4 secunde într-o soluție apoasă de hipoclorit de sodiu, încălzită anterior la 24 ° C. După aceea, hârtia sau țesătura este ținută în aer timp de 16 secunde și ouăle sunt spălate cu un jet de apă pe o sită groasă, uscate și folosite conform destinației.
Depozitare lacewing
Pentru utilizarea cu succes a scobirii, este important să acumulați o sursă suficientă de prădător, astfel încât, dacă este necesar, să fie posibilă eliberarea unui entomofag pe suprafețe mari. În acest scop, a fost dezvoltată o tehnică de conservare a șireturilor în diferite faze ale dezvoltării sale..
Depozitarea ouălor. Condițiile optime pentru depozitarea ouălor de desfacere sunt o temperatură de 5 ° C și o umiditate relativă de 80-90. Doar ouă proaspete sunt potrivite pentru conservare. În funcție de faza dezvoltării embrionare, gradul de supraviețuire a ouălor în timpul depozitării variază. Cea mai acceptabilă păstrare a ouălor atunci când perioada de păstrare nu este mai mare de 20 de zile. În această perioadă, 76-96 embrioni rămân viabili. O conservare mai lungă nu are valoare practică, deoarece majoritatea ouălor în acest timp își pierd viabilitatea. Deci, menținând ouăle în 30-35 de zile, 36-50 de embrioni mor.
Depozitare larvă. Ca și ouăle, larvele de vierme de dantelă sunt improprii pentru conservarea pe termen lung. La temperaturi scăzute, acestea sunt păstrate timp de 30-40 de zile. Larvele de prima vârstă sunt mai potrivite pentru acest lucru. Larvele de vârsta a doua și a treia pot fi păstrate până la 20 de zile. Odată cu stocarea mai lungă, viabilitatea lor scade.
Depozitare cocon. Se păstrează numai cocorii în care se formează pupa, adică la șapte zile de la formarea coconului. Cocorii cu pupa nu s-au format, chiar și în timpul depozitării a 10 zile mor (30-36). Pupa este păstrată la o temperatură de 2 ° C și umiditate relativă de 75. Cu toate acestea, cel mai mare impact asupra supraviețuirii lor este produs de durata de depozitare, care nu trebuie să depășească 10 zile. O ședere mai lungă la temperaturi scăzute duce la moartea semnificativă a insectelor. Deci, dacă este păstrat timp de 20 de zile, viabilitatea se păstrează doar în 41-52 pupae.
Depozitarea indivizilor adulți de reproducere. Cele mai bune condiții pentru conservarea insectelor active adulte sunt temperatura de 4 ° C și umiditatea relativă de 70-90. Dantelele pentru adulți sunt depozitate în site rotunde sau în borcane de sticlă de jumătate de litru sau litru. Pentru a mări suprafața totală utilizabilă, o bancă din carton de foi este plasată în bănci, care împarte banca în patru sectoare.
Pentru depozitare, se folosesc insecte tinere (bărbați și femele). Până la 200 de insecte sunt plasate într-un borcan de jumătate de litru, în băncile cu o capacitate mai mare, numărul acestora este crescut în funcție de volum. Înainte de a începe procesul de depozitare, insectele sunt hrănite cu miere timp de cinci până la șapte zile. În timpul perioadei de păstrare a entomofagelor periodic (o dată la cinci zile), acestea sunt hrănite cu miere sau sirop de zahăr. Insectele destinate depozitării nu dau drojdie autolizată. Astfel de condiții fac posibilă asigurarea conservării pe termen lung a entomofagelor (rata de supraviețuire 85-90) cu o capacitate de reproducere satisfăcătoare. Rețineți că stocarea pe termen lung a femelelor active reduce durata de viață a acestora.
Depozitarea ochilor pentru adulți. Râsul obișnuit în ciclul vieții are o diapauză imaginară, această caracteristică este folosită la depozitarea insectelor. Condițiile sunt create preliminar pentru ele (o zi scurtă care durează 10-12 ore timp de 22-34 de zile), necesare pentru inducerea diapauzei în spălare. Pentru a accelera procesul de tranziție a insectelor la starea diapauzei, hrana cu proteine este exclusă din dieta lor în această perioadă și hrănită doar cu sirop de zahăr. În timpul diapauzei, spălătorii nu depun ouă. În afară de cel activ, diferă prin culoarea corpului..
O gamă de vârfuri de dantelă este păstrată la o temperatură de 5 ° C și o umiditate relativă de 70. În perioada de păstrare, insectele sunt hrănite constant cu un amestec de sirop de zahăr sau miere din autolizatul de drojdie de bere. Acest lucru este necesar pentru a crește fertilitatea prădătorilor..
Insectele din raza de acțiune sunt mai potrivite pentru depozitare decât persoanele active. Chiar și la 150 de zile de la păstrare, peste 70 de spălături au supraviețuit și până la 93 de larve viabile sunt regenerate din ouăle depuse. Insectele se reactivează la o perioadă ușoară de 16 ore și o temperatură a aerului peste 5 ° C.
Tehnologia de reproducere mecanizată a oboselii obișnuite
Pe baza multor ani de cercetare de laborator, angajații Institutului de Cercetare Științifică din Uzbekistan pentru Protecția Plantelor (Tashkent) au dezvoltat un set de echipamente (linie) pentru reproducerea în masă a sârmelor. Setul de echipamente constă din echipamente de cameră cu termostat cu un microclimat controlat și trei echipamente concepute pentru diferite operațiuni tehnologice în creșterea dantelării.
Numirea, datele tehnice și principiul funcționării echipamentelor pentru cultivarea în masă a oboselii obișnuite
Linia mecanizată este proiectată pentru reproducerea în masă a oboselii obișnuite. Este montat în încăperi de laborator în care rețelele de curent electric 220/380 V, 50 Hz AC, alimentare cu apă, ventilație, canalizare.
Productivitatea acestei linii mecanizate este de 1,0 milioane de ouă de dantelă pe zi. Principalele componente ale liniei mecanizate pentru creșterea oboselii obișnuite și principalii indicatori funcționali și scopul părților sale individuale sunt prezentate în tabelul 1 și 2.
Tabelul 1
Principalele componente ale liniei de creștere în masă
Denumirea echipamentului | Numărul de instalații care sunt incluse în linie |
Instalație pentru dozarea larvelor de furaje de lașare | 1 |
Instalare pentru îndepărtarea cocoloaselor de dantelare | 1 |
Rafturi pentru plasarea hexelelor cu larve de vierme de dantelă fig. 2 | 4 |
Camera termostatului | 1 |
Tabelul 2
Principalii indicatori funcționali scopul diferitelor piese ale echipamentului pentru reproducerea în masă a scobirii
Denumirea echipamentului | Scop funcțional | Indicatori cheie |
Plante dozatoare pentru furajare | Proiectat pentru dozarea ouălor de hrănire și spumare în celule hexelice | Productivitatea plantelor - 1 hexel în 5 minute |
Instalații pentru îndepărtarea cocoloaselor de dantelare | Proiectat pentru a îndepărta cocoloanele din dantelă din celulele hexelului | Productivitate - 1 hexel în 10 minute |
Cameră climatică | Proiectat pentru a găzdui hexelii și țesăturile pentru adulți în procesul de fabricație | Numărul de hexeli care sunt așezați pe rafturi - 100 buc. |
Unitate de dozare alimentară pentru larve de vierme de dantelă Este destinat dozei de alimentare în celule hexel, este un cadru cu un rezervor perforat instalat.
Pentru ca toate larvele de vierme de dantelă să se dezvolte aproximativ în același timp, se iau doar ouă proaspete puse pentru incubare. Ouăle unui prădător dintr-o colecție sunt amestecate cu ouăle unui sitotrog în raport de 5 mg de sitotrog per ou de la un ou și la calcularea a 17-20 g de ouă a unui sitotrog per hexel.
Placa de dozare asigură furnizarea a 10 mg de hrană fiecărei celule de hexel. Pansarea repetată de 10 mg în fiecare celulă se efectuează după șase până la opt zile într-o unitate de dozare a furajelor. După 12-15 zile, larvele, având o dezvoltare finalizată, pupează în celulele hexelului. La două-trei zile după puparea larvelor sau 15-17 zile după depunerea ouălor, hexelul este transferat într-o plantă pentru îndepărtarea și colectarea coconilor.
Instalare pentru îndepărtarea și colectarea cocoloaselor de dantelare conceput pentru a îndepărta și a colecta cocoloase de dantelare din hexel Fig. 1. Unitatea este echipată cu o acționare electrică cu alimentare cu hexeli. Presiunea sistemului pneumatic pentru suflarea coconilor în 3-4 atm. sprijinit de compresor. În partea de jos a transportorului se află o tigaie de nucă de cocos cu o rețea de gaz. Cocorii colectați sunt plasați în cuști pentru plecarea adulților și pentru întreținerea ulterioară a acestora.
Cameră climatică Proiectat pentru adulți de reproducție și larve de vierme de dantelă în condiții optime de higrotermie. Ar trebui să susțină următorii parametri: temperatura aerului 26 ± 1 ° C, umiditatea relativă 70 ± 5, fotoperioada 10-18 ore.
Procesul tehnologic de producție a lacewing-ului. Tehnologia de reproducție mecanizată a lacewing-ului constă în următoarele procese principale de producție:
- Colecția populațiilor de entomofage naturale.
- Pregătirea hranei.
- Conținutul insectelor adulte din cuști sau bănci.
- Colectarea ouălor lacewing.
- Incubarea ouălor incubatoare.
- Larve individuale în creștere în hexeli.
- Îndepărtarea și colectarea cocoloaselor de dantelare.
- Amplasarea coconilor în borcane.
- Reproducerea biomaterialului.
- Depozitarea biomaterialului pentru utilizare.
Adulții de lacewing conțin 150 de bucăți în borcane de sticlă de trei litri. sau în cuști speciale pentru 3,5 mii buc. Băncile sau cuștile sunt așezate pe rafturi într-o cameră termostatică, cu fotoperiod reglabil sau într-un dulap climatic. Temperatura optimă a scobirii este de 24-26 ° C, umiditatea relativă este de 65-70. Entomofagul imago este hrănit zilnic cu miere și drojdie de bere autolizată. Fâșii de bumbac întunecat sunt așezate în borcane, pe care își depun ouăle de dantelă. Atunci când lauzele sunt ținute în bănci în fiecare zi, fâșii cu ouă puse pe ele, șuvițele de dantelă sunt scoase din cutie și sunt așezate benzi curate, ouăle de dantelă sunt tăiate cu grijă cu foarfeca dintr-o parte a benzilor, alte ouă reprezentând produse comercializabile. Ouăle de dantelă tăiate deschise sunt amestecate cu ouăle de sitotrog într-un raport de 5 mg de ouă sitotrog pe un ou de spumare și, pe baza de 17-20 g de ouă de sitotrog amestecate cu ouă de dantelă în proporția indicată, sunt turnate pe placa de dozare a unității de dozare a furajelor. După umplerea dozei de ouă cu furaj într-un dispozitiv special - hexel, acesta este închis cu un capac. Hexelii sunt așezați pe rafturi speciale (Fig. 2) într-o cameră termostatică cu fotoperiod reglabil la o temperatură de 24-26 ° C, unde conțin 15-17 zile.
La șapte zile de la ouă, se efectuează o a doua hrănire a larvelor de vierme de dantelă cu o doză de 17-20 g de ouă sitotrog per hexel. După 15-17 zile, capacele hexelelor sunt deschise și cocorii de vierme de dantelă sunt colectați la instalație pentru îndepărtarea cocoanelor (Fig. 1) și 150 buc. amplasate în bănci sau cuști. Larvele care nu au avut timp să pupate sunt așezate în epruvete de 1 probă. și hrăniți sitotrogii cu ouă până când pupează. După începerea plecării imago, procesul de reproducere se repetă. O dată la patru până la cinci zile, băncile de la adulții spălăturilor sunt înlocuite cu altele curate, deoarece larvele se regenerează din ouăle depuse pe pereții conservelor, prezintă canibalism și mănâncă ouă proaspete puse de entomofag.
Creșterea oboselii obișnuite pe medii nutritive artificiale
Cele mai promițătoare substanțe de alimentare pentru larvele de vierme obișnuite sunt mediile nutritive microcapsulate, care în ceea ce privește proprietățile fizice și compoziția biochimică imită hrana naturală a unui prădător.
A fost elaborată formularea mai multor medii nutritive lichide pentru formarea larvelor de vierme de dantelă și a unei instalații pentru ambalarea mediilor nutritive din microcapsule. Utilizarea mediilor de cultură artificială microcapsulate permite reducerea cu 90-92 a costurilor ouălor de molii de cereale și reducerea semnificativă a costului total al creșterii de dantelă.
Tipuri de medii nutritive artificiale și tehnologii pentru prepararea lor
Este cunoscut faptul că lașul obișnuit este cel mai eficient utilizat în controlul biologic al afidelor în faza larvelor de al doilea instar. Mai multe tipuri de medii de cultură sunt utilizate pentru a hrăni larvele (Tabel. 3).
Tabelul 3
Formularea substanțelor nutritive artificiale pentru larvele obișnuite
component | Conținutul componentei în mediu (g / 120 ml de mediu) | |||
eu | II | III | IV | |
peptonă | 4.80 | - | - | - |
Cazeină Hidrolizat enzimatic | - | 2,84 | 3,72 | 5,00 |
Hidrolizat enzimatic de proteine de soia | - | - | - | 5,00 |
Extract de drojdie | 4.24 | 1,88 | 2,68 | - |
Extract de germeni de grâu | 4,32 | 5,68 | 6,96 | - |
Zahăr sau zahăr alimentar | 6,00 | 14,00 | 6,00 | 15,00 |
Amestec de lipide | 0,12 | 0,20 | 0,12 | 0,55 |
vitamine | ||||
Clorură de colină | 0050 | 0050 | 0050 | 0050 |
Vitamina C | 0100 | 0100 | 0100 | 0100 |
Vitamina B12 | 0.000004 | 0.000004 | 0.000004 | 0.000004 |
Acidul nicotinic | - | - | - | 0.0020 |
Pantetonat de calciu | - | - | - | 0.0020 |
Vitamina B1 | - | - | - | 0.00050 |
Vitamina B6 | - | - | - | 0.00050 |
Vitamina B2 | - | - | - | 0.0010 |
Acid folic | - | - | - | 0.00050 |
biotină | - | - | - | 0,00004 |
inozitol | - | - | - | 0,020 |
Săruri minerale | ||||
Fosfat de sodiu monosubstituit | 0.0800 | 0.0800 | 0.0800 | 0.0800 |
Sulfat de magneziu | - | - | - | 0050 |
Sulfat de fier | - | - | - | 0005 |
Fosfat de potasiu disubstituit | - | - | - | 0160 |
Colorant roșu neutru | 0,024 | 0,024 | 0,024 | 0,024 |
Emulsificator twin-80 | 0,120 | 0,120 | 0,120 | 0,120 |
Apa distilată | până la 120 ml | până la 120 ml | până la 120 ml | până la 120 ml |
Mediile nutritive (I-III) sunt recomandate pentru hrănirea larvelor din momentul renașterii până la prima mutare și la începutul vârstei a doua. Aceste medii sunt complet schimbabile și sunt utilizate în funcție de prezența anumitor componente în laboratorul biologic. Miercuri IV este recomandat pentru antrenarea larvelor de vierme din secolele al II-lea și al III-lea în timpul reproducerii populațiilor de laborator.
Obținerea hidrolizat enzimatic de cazeină
Prepararea celei de-a doua soluții de cazeină. Cazeina (30 g) a fost agitată cu 1500 ml soluție KOH 0,01 n la 40 ° C timp de trei ore. Valoarea pH-ului este monitorizată la fiecare 15 minute și menținută în pH 8 prin adăugarea în picătură de 0,1 n KOH. Soluția rezultată este un lichid clar, extrem de opalescent..
Hidrolizat de pancreas. Pancreatinum (300 mg) se amestecă cu 5 ml soluție de 2 cazeine în 0,1 n KOH la 40 ° C timp de 40 minute. Soluția de preparare a enzimelor rezultate este adăugată la cea mai mare parte a soluției alcaline de cazeină în trei porții egale la fiecare 3 ore. După adăugarea ultimei porțiuni de enzimă, soluția este agitată încă 15 ore la 40 ° C și pH 8.
Tratamentul cu Pepsin al hidrolizatului pancreatic. La sfârșitul hidrolizei pancreatice, soluția este acidulată cu 2 n acid sulfuric cu agitare puternică până la pH 2. Pepsin (300 mg) se dizolvă cu agitare în 5 ml de apă și se introduce în hidrolizat acidifiat în trei porții egale la fiecare 3 ore. După adăugarea ultimei porțiuni de enzimă, amestecul de reacție a fost agitat pentru încă 15 ore la 40 ° C și pH 2.
La sfârșitul hidrolizei, la aceasta se adaugă prin picurare o soluție apoasă saturată de hidroxid de bariu la pH 7. Precipitatul de sulfat de bariu format este separat prin centrifugare (5700 g, 5 ° C, 10 min) și îndepărtat. Supernatantul este concentrat la un volum de 150 ml, hidrolizat concentrat este liofilizat. Hidrolizat de cazeină enzimatică liofilizată este o pulbere amorfă albă, ușor solubilă în apă. Randament 28,5 g (95).
Obținerea unui hidrolizat enzimatic de proteină de soia
Izolarea proteinelor de soia. Semințele de soia (375 g) sunt zdrobite într-o moară electrică, amestecate cu 1 L de eter de petrol, agitate timp de o oră la 20 ° C, precipitatul este separat prin centrifugare (5700g, 10 ° C, 5 min). Degresarea făinii de soia se repetă încă de două ori, după care se usucă la aer. Producția de făină degresată este de 300 g (80). Faina de soia rezultată se amestecă intens cu 3 l de apă distilată timp de o oră la 20 ° C..
Partea care nu s-a dizolvat a fost separată prin centrifugare (5700 g, 10 ° C, 30 min) și precipitată, supernatantul a fost acidulat prin picurare cu acid clorhidric 0,1 N până la pH 4,5 cu agitare și lăsat timp de 1 oră la 20 ° C. Precipitatul a fost separat prin centrifugare (5700 g, 10 ° C, 10 min), spălat cu apă rece (3 × 100 ml), supernatantul și spălările au fost aruncate. Precipitatul a fost amestecat cu 0,5 l de apă, s-a adăugat prin picurare 0,1 n KOH la amestec la pH 8, clarificat prin centrifugare (5700 g, 10 ° C, 30 min). Supernatantul a fost acidulat cu acid clorhidric 0,1 N până la pH 4,5, amestecul a fost agitat timp de o oră la 20 ° C. Proteina reprecipitată a fost separată prin centrifugare (5700 g, 10 ° C, 30 min), spălată cu apă rece (3 × 100 ml) și liofilizată. Randamentul proteinei liofilizate este de 30 g (10).
Prepararea celei de-a doua soluții proteice de soia. Proteina liofilizată (30 g) a fost agitată la 40 ° C cu 1500 ml dintr-o soluție de 0,1 N KOH timp de 3 ore. PH-ul soluției a fost menținut adăugând prin picurare 0,1 N KOH la opt. Apoi, soluția este încălzită într-o baie de apă (90-95 ° C, 30 min) și răcită la temperatura camerei.
Prelucrarea soluției rezultate cu pancreatină. Pancreatina (1 g) este dizolvată în 5 ml soluție de proteine de soia cu 2 minute de agitare. Soluția rezultată a fost adăugată în trei porții egale la volumul principal al soluției proteice de soia la fiecare 3 ore. Durata hidrolizei enzimatice este de 48 de ore (40 ° C, agitare puternică).
Tratamentul cu Pepsin al hidrolizatului pancreatic. La sfârșitul hidrolizei pancreatice, o soluție 2N de acid sulfuric, pH-ul hidrolizatului este ajustat la două. Apoi, 300 mg de pepsină se dizolvă în 5 ml de apă și se adaugă în trei porți egale la proteina de soia hidrolizat la fiecare 3 ore. Durata hidrolizei este de 24 de ore la pH 2, 40 ° C cu agitare viguroasă.
PH-ul soluției a fost ajustat la pH 7 prin adăugarea unei soluții apoase saturate de hidrat de oxid de bariu. Precipitatul a fost îndepărtat prin centrifugare (5700 g, 10 ° C, 10 min), supernatantul a fost liofilizat.
Hidrolizat enzimatic liofilizat al proteinei de soia este o pulbere amorfă gălbui, solubilă în apă. Randament - 20 g (66).
Ambele preparate ale hidrolizaților de proteine enzimatice sunt păstrate într-un recipient de sticlă închis ermetic la 5 ° C timp de până la 12 luni.
Obținerea unui amestec de lipide
Într-o cantitate minimă de eter sulfuric, 1 g de colesterol este dizolvat, amestecat cu 5 g ulei de soia în 5 g de lecitină de floarea soarelui. Eterul de sulf se evaporă la o temperatură a unei băi de apă nu mai mare de 40 ° C. Amestecul poate fi păstrat la 5 ° C timp de un an..
Obținerea extractului de drojdie
1,8 kg de biomasă de drojdie de bere sunt separate de substratul nutritiv prin centrifugare (5700 g, 4 ° C, 20 min).Saccharomyces cerevisiae) și spălat de două ori cu apă distilată la rece. Autoliza se efectuează în 2,7 l de apă la 37 ° C (raportul dintre biomasa drojdiei și a apei este de 1: 1,5) timp de două zile. Autolizatul obținut este centrifugat (5700 g, 4 ° C, 20 min), filtrat printr-un filtru bacterian și liofilizat. Randamentul extractului liofilizat este de 10 în greutate drojdie crudă.
Extractul de drojdie uscată liofilizată este o pulbere amorfă higroscopică maro, solubilă în apă fără reziduuri. Perioada de valabilitate la 5 ° C - cel puțin 12 luni.
Obținerea unui extract de germeni de grâu
330 g germeni de grâu sunt zdrobite într-o moară electrică, amestecate cu 0,9 L eter de petrol și agitate timp de 2 ore la 20 ° C. Precipitatul a fost separat prin centrifugare (5700 g, 4 ° C, 10 min). Degresarea embrionilor se repetă încă de două ori, după care sunt uscate în aer. Făină fără grăsime produce 100 g (30,3).
100 g de făină fără grăsime din germeni de grâu (raport făină la apă - 1:10) se amestecă cu apă distilată și se agită încă 4 ore la o temperatură de 20 ° C. Precipitatul a fost separat prin centrifugare (5700 4 ° C, 20 min), și apoi extras din nou cu apă (raportul dintre făină și apă - 1: 5). Apa de spălare este combinată și liofilizată. Randamentul extractului de germeni liofilizat este de 41 g (41).
Extractul de germeni liofilizat este o pulbere amorfă albă, ușor solubilă în apă. Perioada de valabilitate la 5 ° C - cel puțin 12 luni.
Pregătirea mediilor de cultură
Miercuri 1. În 60 ml de apă distilată se dizolvă 80 mg NaH2PO4 × 2H2O, 6 g zaharoză sau zahăr alimentar și 4,24 g extract de drojdie. Amestecul s-a menținut la temperatura camerei timp de 3 ore, apoi s-au dizolvat 4,32 g extract de germeni de grâu, 4,8 g de peptonă, 0,25 ml soluție 20% de clorură de colină (50 mg), 1 ml soluție de vitamina B12. 0,004 mg), 100 mg vitamina C, 24 mg colorant (roșu neutru), 120 mg emulgator (tween-80) și 120 mg amestec de lipide. Volumul total al mediului nutritiv este ajustat cu apă distilată la 120 ml.
După adăugarea fiecărui ingredient, amestecul este agitat bine. Amestecarea finală se realizează folosind un omogenizator electric (8000 rpm / min, 2 min). Mediul de creștere omogenizat este filtrat printr-un filtru de sticlă Schott nr. 3. Mediul final este ambalat în fiole de sticlă, sigilat și depozitat la o temperatură de minus 10 ° C. Perioada de valabilitate admisă în aceste condiții nu depășește 6 luni.
Miercuri II și III. Este preparat în același mod ca mediul I, dar în loc de peptonă, se adaugă cantitatea necesară de hidrolizat enzimatic de cazeină.
Miercuri IV. Probele de săruri minerale sunt dizolvate în 25 ml dintr-o soluție de vitamina B2 (1 mg): K2HP04 × ZN20 - 160 mg, MgS04 × 7H20 - 50 mg, NaH2P04 × 2H2O - 80 mg și 20 mg de inositol. Apoi, se adaugă soluții apoase de vitamine preparate în prealabil - 1 ml de soluție dintr-un amestec de acid nicotinic și pantotenat de calciu (2 mg fiecare), 1 ml de soluție dintr-un amestec de vitamine B1 și B6 (0,5 mg fiecare), 1 ml de soluție de biotină (0,04 mg fiecare) ), 1 ml de soluție de vitamina B12 (0,004 mg), 54 ml soluție de acid folic (0,5 mg), 0,25 ml din a 20-a soluție de clorură de colină (50 mg) și 1 ml de soluție FeS04 × H20 (5 mg).
În amestecul rezultat de minerale și vitamine, se dizolvă 15 g de zaharoză sau zahăr alimentar, 5 g de hidrolizat enzimatic de cazeină, 5 g de proteină de soia enzimatică hidrolizat, 100 mg de vitamina C și 24 mg de colorant roșu neutru. Apoi, la amestec se adaugă 120 mg de Tween-80 și 550 mg de amestec de lipide. Volumul total a fost ajustat cu apă distilată la 120 ml. Amestecul este agitat, filtrat și păstrat în același mod ca mediile anterioare..
Mediile nutritive sunt o emulsie cu o greutate specifică de aproximativ 1,075 g / cm3, care nu este stratificată în timpul zilei la 5 ° C.
Fabricarea capsulelor de capsule
Compoziția de coajă este pregătită după cum urmează: 59,4 parafină și 39,6 ceară de albine sunt topite într-un vas metalic pe o sobă electrică la 110-115 ° C, apoi se adaugă 1 acid oleic. Masa topită este filtrată printr-un strat de vată, ambalat și depozitat într-un recipient metalic protejându-se de praf. Materialul de coajă întărit este o masă amorfă galbenă cu un punct de topire de 85-90 ° C.
În timpul producției în masă a desfacerii obișnuite, este recomandabil să se producă elemente nutritive sau componente media și coji de capsule la o întreprindere specializată.
Tehnica de diluare a spălării pe medii nutritive microcapsulate
Cultivarea dantelelor pe medii nutritive microcapsulate, precum și pe orice altă formă de hrană include următoarele procese principale: conținutul de imago, colectarea ouălor de vierme de dantelă, incubația ouălor, prepararea și microcapsularea mediilor nutritive artificiale, cultivarea larvelor, insectelor adulte.
Conținutul de insecte pentru adulți și colectarea ouălor. Imago este conținut în cuști cilindrice cu un diametru de 20 cm și o înălțime de 10 cm. Pereții sunt din plastic vinil subțire grosime de 3-4 mm sau alt material adecvat. Partea de jos a coliviei este tifon pliată în două straturi, iar capacul este din hârtie densă. Partea de jos și capacul încărcăturii sunt fixate cu un inel de cauciuc.
Al 40-lea autolizat de drojdie de bere și miere cu polen sunt utilizate ca nutreț pentru adulți, ceea ce contribuie la creșterea fecundității adulților.
Autolizatul și mierea se aplică pe bucăți individuale de cauciuc spumos cu o dimensiune de 30x20x5 mm, care sunt apoi suspendate în cuști. Adulții obținuți în timpul reproducerii populației de laborator ar trebui să fie hrăniți numai cu miere, iar apoi cu miere și drojdie se autolizează, pentru primele patru până la cinci zile după renaștere.
Aproximativ 100 de perechi de insecte sunt păstrate într-o cușcă. Fertilitatea unei femele cu o astfel de hrănire și densitate este în medie de 300 de ouă pe perioada de ouă (20-25 de zile). hrănirea adulților și colectarea ouălor se realizează prin metode general acceptate cel puțin o dată pe zi. Cuștile cu insecte adulte conțin la 20-25 ° C și 70-80 umiditate relativă într-o cameră sau cutie specială.
Incubarea ouălor. Ouăle de dantelă obținute într-o zi sunt împrăștiate în vasele Petri și plasate într-un termostat, în care se menține automat o temperatură constantă de 25 ± 1,5 ° C și o umiditate relativă de 75-80. În termostat, sunt instalate suplimentar lămpi fluorescente și dispozitive de monitorizare a luminii de zi. Un astfel de termostat este de asemenea utilizat pentru educarea larvelor și păstrarea imago..
Concomitent cu incubația ouălor, încep să pregătească substanțe nutritive și să le încapsuleze..
Pregătirea și microcapsularea mediilor de cultură. Tehnologia de pregătire a mediilor de cultură este prezentată mai sus. Microcapsularea se realizează pe o instalație specială, a cărei schemă este prezentată mai departe fig.3.
Principiul de funcționare a instalației este următorul: mediul de nutrienți răcit din rezervor 1 intră sub presiune în canalul intern al unității de încapsulare 2. Simultan din rezervorul 3, materialul înveliș topit intră în golul dintre canalele interne și externe ale unității 2. Condițiile de temperatură necesare sunt menținute în rezervoarele 1 și 3, în sistemele de alimentare pentru coaja 4 și mediul nutritiv 5 de către ultra-termostatele 6 și 7. Presiunea necesară a mediului și a cochiliei este creată folosind un reductor de presiune 8 și un cilindru cu azot comprimat 9. În unitatea de încapsulare 2 se obține efectul formării cu două lichide jetul sub influența tensiunii superficiale și scăderea temperaturii se descompune în capsule individuale cu un mediu nutritiv. Capsulele se întăresc la cădere și sunt colectate într-un recipient 10.
Modul de funcționare optim al instalației: presiunea în sistem este de 4,5 kg / cm2, temperatura mediului este de 8-12 ° C, iar temperatura învelișului este de 85-90 ° C. Microcapsulele rezultate au o formă sferică, cu un diametru de 400-600 microni, o grosime de coajă de 15-20 microni. Conținutul de mediu nutritiv din microcapsule este de cel puțin 75-80 din masa totală. Lucrările la instalare cu microcapsulare a substanțelor nutritive se efectuează conform instrucțiunilor de utilizare a acestuia.
Microcapsulele sunt fixate pe plăci de sticlă cu adeziv, care este a cincea soluție apoasă de alcool polivinilic cu adăugarea de nitrat de argint ca antiseptic.
Pregătiți adezivul după cum urmează: 50 g pulbere de alcool polivinilic se dizolvă într-un balon de sticlă cu 700 ml de apă distilată (temperatura băii de apă 70-80 ° C). Soluția preparată de alcool polivinilic este răcită la temperatura camerei și se introduc în ea 2 ml de soluție 0,05 de nitrat de argint. Apoi volumul total este ajustat la 1000 ml. Adezivul poate fi păstrat într-un recipient sigilat la o temperatură de 3-7 ° C timp de două luni. Plăcile de sticlă cu microcapsule lipite într-un singur strat și introduse în desicator pot fi păstrate la frigider timp de 10-12 zile la o temperatură de 3-7 ° C și o umiditate relativă de 70-90 (în desicator).
Lista materialelor necesare pentru prepararea mediilor de cultură și a materialelor de capsulă:
- peptonă.
- Cazeină Hidrolizat enzimatic.
- Hidrolizat enzimatic de proteine de soia.
- Extract de germeni de grâu.
- Extract de drojdie.
- zaharozei.
- Ulei de soia presat hidratat.
- Lecitina de floarea soarelui.
- colesterol.
- Clorură de colină.
- Acid ascorbic.
- Cianocobalamina (B12).
- Acidul nicotinic.
- Pantotenat de calciu.
- Clorura de tiamina.
- Clorură de piridoxină (B6).
- Riboflavina (B2).
- Acid folic.
- biotină.
- inozitol.
- Fosfat de sodiu Monosubstituit.
- Fosfat de potasiu dezubis.
- Sulfat de magneziu.
- Sulfat de fier oxidat.
- Colorant roșu neutru.
- Twin 80.
- Ceară de parafină.
- ceară de albine.
- Acidul oleic.
- Alcool polivinilic.
- Ester metilic al acidului P-hidroxibenzoic.
Larva Care. Eclozarea și dezvoltarea larvelor are loc în cuști specializate, care constau din două plăci, cu dimensiuni de 18-24 cm și cu o filă de celule de hârtie între.
Filele de hârtie sunt pre-dezinfectate prin scufundarea într-o soluție alcoolică de metaben (esterul metilic al acidului paraoxibenzoic) și acid sorbic (1 g de metaben și 2 g de acid sorbic sunt dizolvate într-un litru de alcool etilic). Soluția este pregătită în prealabil și păstrată la frigider într-un vas cu opritor măcinat. După prelucrare, filetele sunt uscate câteva ore în aer.
După trei zile de păstrare într-un termostat, ouăle de dantelă sunt împrăștiate uniform pe celulele file, la viteza de unu sau două ouă pe celulă. Dantelele sunt plasate înapoi în termostat, unde este menținută o lumină de zi de 16 ore. După ce începe eclozarea larvelor, placa superioară a cuștii este înlocuită cu o placă cu un mediu nutritiv încapsulat artificial. Pentru a educa larvele din momentul renașterii până la prima mutare, este suficient să schimbi farfuria cu mâncare o dată (două-trei zile după renaștere). Randamentul larvelor secundare utilizate pentru producția de masă într-o seră este de 60-70.
S-a stabilit că pentru a obține insecte adulte cu efectiv deplin și pentru a crește randamentul lor, este necesar să hrănești larvele din prima vârstă cu ouă de o molie de boabe, apoi larve din secolele al II-lea și al III-lea pentru a le crește pe un mediu nutritiv microcapsulat IV, care satisface cel mai mult nevoile de hrănire ale larvelor din aceste secole. Plăcile cu alimente încapsulate sunt schimbate în același mod ca pentru prima vârstă, o dată la două-trei zile. Consumul de ouă de molie cu acest tip de reproducere a populației este de numai 8-10 din totalul necesarului de hrană. Pentru creșterea a 1000 de larve din prima vârstă, este necesar să se cheltuiască aproximativ 35 g de furaje artificiale (mediu I-III), pentru creșterea larvelor din secolele al II-lea și al III-lea în timpul reproducerii populației - 60-70 g (mediu IV).
Obținerea insectelor pentru adulți. Filele de hârtie cu cocoloși la șase până la șapte zile de la puparea larvelor sunt transferate în cuști adulte. Revigorarea insectelor adulte are loc în a opta până la a noua zi. Randamentul adulților formați în mod normal atinge 70. Insectele care zboară sunt hrănite, așa cum se arată mai sus. Depunerea ouălor începe de obicei la șase până la opt zile după renașterea imago-ului..